Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para Borrelia burgdorferi en lesiones de esclerodermia localizada (morfea), en pacientes venezolanos / Using the polymerase chain reaction to Borrelia burgdorferi infection in localized scleroderma injure (morphea), in venezuelan patients

Borrelia burgdorferi es el agente causal de Borreliosis de Lyme, una enfermedad infecciosa multisistémica transmitida al humano por la picadura de garrapatas del género Ixodes. En los últimos años se ha postulado una posible asociación entre ésta espiroqueta y esclerodermia localizada (morfea). Sin embargo, los datos publicados no han proporcionado pruebas inequívocas de tal asociación. En Suramérica, incluida Venezuela (estado Zulia) se han detectado pruebas serológicas positivas en pacientes con morfea. El objetivo de este estudio fue buscar evidencia definitiva de la infección por Borrelia burgdorferi en pacientes con morfea, mediante la detección del ADN bacteriano en muestras de piel. En los 21 pacientes la PCR resultó negativa. La ausencia de amplificación de la secuencia blanco seleccionada en las muestras estudiadas no apoyan una asociación entre la infección por Borrelia burgdorferi y las lesiones escleróticas de morfea, pero tampoco descartan la posibilidad de una relación entre morfea y una genoespecie desconocida del complejo Borrelia burgdorferi sensu lato, entre morfea y una especie diferente de Borrelia o entre morfea y otra espiroqueta, como agente etiológico de la lesión en la localidad.

Borrelia burgdorferi is the causative agent of Lyme Borreliosis, an infectious multisystemic disease transmitted to humans by the Ixodes ticks bite. A possible association of Borrelia burgdorferi with localized scleroderma has been postulated. However, published data do not provide unequivocal results. Previus serologic analysis of patients with localized scleroderma in South American countries (including Venezuela), have been reported as yielding some reactivity. The present study looked for evidence of Borrelia burgdorferi infection in venezuelan patients with localized scleroderma, using the polymerase chain reaction to analyze 21 skin samples of patients with this skin condition. The results were negative in all the samples studied. Our data do not support an association of Borrelia burgdorferi infection and the sclerotic lesions of localized scleroderma; but do not rule out the possibility of a relationship between localized scleroderma and an unknown geno-specie of Borrelia burgdorferi sensu lato complex, a different Borrelia specie or a different spirochetal organism, as the etiological agents of the skin lesions in this area.

Anticuerpos séricos antiglicolípido fenólico 1 en personal de centros de salud en contacto con pacientes con enfermedad de Hansen / Antiphenolic glycolipid-1 antibodies in personnel in health centers in contact with Hansen´s disease patients

La lepra es una enfermedad con diferentes formas clínicas, sin embargo, es poco el conocimiento que se tiene sobre portadores de Mycobacterium leprae (M. leprae), así como de su transmisión y los fenómenos inmunológicos que conllevan a la aparición de la enfermedad. El antígeno Glicolípido Fenólico 1 (PGL-1) es un factor de virulencia, específico del M. leprae que protege a la bacteria del ataque de los macrófago. El objetivo principal de la siguiente investigación fue detectar anticuerpos anti PGL-1 en el personal en contacto estrecho con pacientes con lepra, para conocer su grado de exposición al bacilo y su utilidad como factor de riesgo para sufrir la enfermedad. Se seleccionó un grupo de individuos (n: 52) en contacto frecuente con pacientes leprosos y un grupo control (n: 60) sin contacto demostrado. La presencia de anticuerpos séricos IgM anti PGL-1 se determinó por la técnica de ELISA. Del total analizado, se detectaron anticuerpos anti-PGL-1, en 22 muestras (42,3%) del grupo expuesto y 3 (5,0%) en el grupo control (p<0,05). No se observaron diferencas en relación al sexo (45,5% vs. 41,5%). Se encontró un predominio de la seropositividad en el personal entre 36 a 55 años, sin relación a los años de exposición. Se destaca una mayor frecuencia en el personal médico (73,3%) y un riesgo relativo de exposición al bacilo de la Lepra del 1.9 en la población expuesta. Estos resultados demuestran un mayor porcentaje de personas seropositivas al anti-PGL-1 en el personal de centros de salud, relacionado al grado de exposición al bacilo de Hansen, especialmente el personal médico. Hallazgos que sugieren riesgo incrementado de adquirir M. leprae con respecto a la población general. Se recomienda la toma de medidas de bioseguridad, así como realizar un seguimiento serológico de los casos positivos del presente estudio.

Absence of borrelia burgdorferi antibodies in the sera of Venezuelan patients with localized scleroderma (morphea)

En los últimos años se ha postulado una posible asociación entre Borrelia burgdorferi ( Bb ) y esclerodermia localizada (morfea). Sin embargo, los datos publicados no han proporcionado pruebas inequívocas de tal asociación. En Suramérica se han realizado estudios serológicos que han evidenciado resultados positivos. El objetivo de este estudio fue buscar evidencia de la infección por Bb en pacientes venezolanos con morfea, mediante la detección de anticuerpos antibacterianos, usando el protocolo de dos pasos recomendado por el Center for Disease Control and Prevention de Atlanta (Estados Unidos). Veintiún muestras de suero de pacientes con morfea y veintiún muestras de sujetos sanos (control) fueron analizadas. Cuatro muestras resultaron ELISA positivas: tres correspondieron a pacientes con morfea y una, a un sujeto control. Todas las muestras ELISA positivas fueron negativas en la prueba IgG Western Blot. Los resultados obtenidos no soportan una asociación entre la infección por Bb y las lesiones escleróticas de morfea, pero tampoco descartan la posibilidad de una relación entre morfea y una genoespecie desconocida del complejo Bb sensulato, entre morfea y una especie diferente de Borrelia o entre morfea y otra espiroqueta, como agente etiológico de la lesión en la localidad

Evaluación de la bacilospocia, cultivo y reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar / Evaluation of baciloscopy, cultivation and polimerasa chain reaction for the diagnostic of lung tuberculosis

La utilidad de la baciloscopia, cultivo y la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP) fue evaluada en 31 muestras de esputo, provenientes de pacientes de ambos sexos, sin distinción de grupo étnico y edades comprendidas entre los 17 y 80 años, con manifestaciones clínicas, hallazgos radiológicos y/o datos epidemiológicos sugestivos de tuberculosis pulmonar. A todas las muestras, se les practicó baciloscopia utilizando la técnica de coloración de Ziehl-Neelsen. Se utilizó el medio de cultivo Ogawa-Kudoh como estándar. Los objetivos para el ensayo de RCP fueron los genes que codifican la proteína de 32-KDa. y la secuencia de inserción IS6110. Luego de la amplificación, se obtuvo un fragmento de 984 pares de bases correspondiente a la secuencia de inserción IS6110 y otro de 506 pares, correspondiente al antígeno alfa 32-KDa. Del total de muestras examinadas por el método de Ziehl-Neelsen, 19 resultaron positivas y 12 resultaron negativas (61,29 y 38,71 por ciento respectivamente). De las 31 muestras sembradas 19 (61,29 por ciento) resultaron positivas y 12 (38,71 por ciento) fueron negativas al cultivo. De todas las muestras amplificadas, 22 (70,96 por ciento) mostraron la presencia de fragmentos de ADN correspondientes tanto a la secuencia de inserción IS6110, como al antígeno alfa 32 KDa., mientras que en 9 (29,04 por ciento) no se detectó la presencia de ADN micobacteriano por el método de RCP. La sensibilidad de la prueba RCP fue virtualmente de 100 por ciento y su especificidad fue del 75 por ciento. Se demostró que el RCP, basado en la amplificación simultánea del elemento de inserción IS6110 y del gen que codifica el antígeno alfa en un solo paso, puede identificar infecciones por micobacterias a partir de muestras de esputo. Se concluye que esta técnica es más sensible que los procedimientos bacteriológicos de rutina (examen directo y cultivo) y la convierten en una herramienta muy poderosa para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar y otras enfermedad...

Candidiasis vaginal en primigestas / Vaginal candidiasis in primigravidas

Determinar evidencias de candidiasis vaginal en pacientes que acuden a la consulta prenatal de la Maternidad Castillo Plaza, utilizando como medio diagnóstico el test Intray Colotex Yeast. Se estudiaron embarazadas primigestas con sospecha clínica de candidiasis vaginal. Las muestras de secreción vaginal se inocularon en el medio Intray Colorex Yeast e incubaron a 37°C durante 48 a 72 horas. Maternidad Castillo Plaza de Maracaibo, Estado Zulia. Se demostró que un 38 por ciento (24 pacientes) presentaron candidiasis vaginal. Candida albicans fue la especie más frecuente (88 por ciento), seguida por glabrata (8 por ciento) y krusei (4 por ciento). El desarrollo de colonias verdes, rosado claro (albicans, glabrata y krusei respectivamente) sugiere la utilidad del medio Intray Colorex Yest para la identificación rápida de las principales especies productoras de candidiasis

Respuesta inmunitaria y anergia. Estudio en pacientes tuberculosos del Hospital Universitario de Maracaibo, Venezuela / Immunitary response and anergy. Study in tuberculosis patients from the Universitary Hospital, Maracaibo, Venezuela

RESUMEN: Con el objeto de evaluar la anergia en individuos infectados con el Mycobacterium tuberculosis se estudiaron 57 pacientes y 15 controles sanos de ambos sexos y edades diferentes, a los cuales se les practicó cultivo bacteriológico de esputo (BK) y la intradermoreacción con el PDD. La prueba de tuberculina en piel fue realizada inoculando 0.1 ml de PPD vía intradérmica con resultados evaluados a las 72 horas. Un total de 28 pacientes resultaron BK+ y 29 BK-. Del grupo BK+, 15 resultaron PPD+ y 13 PPD-, estos últimos fueron clasificados como pacientes anérgicos (BK+PPD-). De los 29 pacientes restantes (BK-), 20 fueron PPD+ y 9 PPD-. Todos los controles resultaron BK- PPD-. Solamente se evaluó la anergia en pacientes BK+ (28 individuos).Los pacientes fueron clasificados desde el punto de vista clínico en tres series: Serie N: 27 pacientes TBC + BK-, Serie P: 28 pacientes TBC + BK+ y Serie EP: 2 pacientes con TBC extra pulmonar. Según el grado de complicación pulmonar, los pacientes se separaron en dos grupos, de acuerdo a la extensión y tipo de lesión encontrados en la evaluación con rayos X. El ôgrupo 1ö con 9 pacientes (32.14 %) presentó lesiones unilaterales con o sin cavernas y el ôgrupo 2ö con 19 pacientes (67.85 %) con lesiones bilaterales con o sin cavernas. Se realizó el Test de transformación linfoblástica (TTL) estimulando con PHA y/o PPD, para lo cual se recolectaron muestras de sangre periférica con heparina. Las concentraciones de IL-4, IL-6 INF-gama obtuvieron por ensayos inmunoenzimáticos en sobrenadante de cultivos y en plasma, posterior a la estimulación con el PPD. El análisis estadístico se realizó utilizando el Test T de Student pareado, Análisis de Varianza y el Chi cuadrado. Sólo los controles y los pacientes BK-, mostraron respuesta normal a la PHA, en contraste, los pacientes BK+ PPD+ presentaron una supresión de la respuesta frente a la PHA de aprox. 90 %. Los pacientes PPD+ mostraron una respuesta superior en cultivo que los pacientes PPD-. La concentración de IL-4 en el plasma de los pacientes anergicos (PPD-) mostró una diferencia significativa (P<0.05) con respecto al grupo PPD+. La concentración de INF-gama fue inferior en los pacientes anérgicos mas no significativamente diferente a la de los pacientes PPD+. Similar resultado se obtuvo en la medición de IL-4 INF- en sobrenadante de cultivo. Se pudo observar la presencia de pacientes con IL-4 + INF-gama, INF-gamao IL-4 solamente...

Estudio comparativo de las técnicas de inmunofluorecencia indirecta (IFI) y Elisa para la detección de parvovirus B19 / Comparative assay of indirect immunonofluorescence and Elisa techniques for the parvovirus B19 detection

Se evaluaron 53 sueros provenientes de pacientes con diversos desórdenes hematológicos y 15 sueros controles, para determinar la seroprevalencia de IgG e IgM específicos del Parvovirus B19 (P. B19) empleando las técnicas de Inmunofluorecencia indirecta (IFI) e Inmunoensayoenzimático (ELISA). La prevalencia de IgG específica del grupo control por ambos métodos fue de 46,6 por ciento, en los pacientes en crisis de 83,3 por ciento (IFI) y 66,7 por ciento (ELISA), y en los pacientes sin crisis de 68,9 por ciento (IFI) y 72,4 por ciento (ELISA); observandose IgM (+) sólo en los pacientes en crisis: 8,3 por ciento (IFI) y 29,1 por ciento (ELISA). La elevada seroprevalencia (IgG) observada frente al control, podría deberse a una mayor exposición al virus por parte de los pacientes. La concordancia entre ambas técnicas para IgG fue de 81 por ciento y para IgM de 93 por ciento, sin embargo, ELISA resultó ser más sensible para detectar IgM de P.B19. A pesar de la evidencia serológica y evaluando un sólo especimen sérico por paciente, se pudo establecer la asociación entre crisis aplástica e infección viral, para IgM ELISA pero no para IgG